尊龙凯时四环素类检测试剂盒使用说明书（酶联免疫法）

1. 原理及用途

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，能够检测组织、蜂蜜、鸡蛋等样本中的四环素类药物（Tetracyclines，TCs）。该试剂盒包括预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂。在检测过程中，添加标准品或样品溶液，样本中的四环素类药物会竞争抗四环素类药物抗体，随后通过TMB底物显色，样本的吸光度与四环素类药物含量呈负相关，结合标准曲线可得出样本中药物的残留量。

2. 技术指标

2.1 灵敏度

005 ppb (ng/ml)

2.2 反应模式

37℃，30分钟 + 30分钟 + 15分钟

2.3 检测下限

• 组织、肝脏、鸡蛋：2 ppb
• 蜂蜜：2 ppb
• 尿样：0.5 ppb
• 牛奶：2 ppb
• 奶粉：4 ppb

2.4 交叉反应率

• 四环素：100%
• 强力霉素：70%
• 金霉素：10%
• 土霉素：10%

2.5 样本回收率

• 组织：85 ± 20%
• 肝脏、鸡蛋：75 ± 20%
• 蜂蜜：85 ± 20%
• 尿样：80 ± 20%
• 牛奶、奶粉：75 ± 20%

3. 试剂盒组成

• 酶标板：96孔
• 高浓度标准品溶液（1瓶）：100 ppb
• 标准品溶液（0 ppb、0.05 ppb、0.1 ppb、0.2 ppb、0.4 ppb、0.8 ppb，均为空瓶子，现配现用）
• 酶标记物（红盖）：11 ml
• 抗体工作液（蓝盖）：55 ml
• 底物液A（白盖）：6 ml
• 底物液B（黑盖）：6 ml
• 终止液（黄盖）：6 ml
• 20×浓缩洗涤液（白盖）：40 ml
• 5×复溶液（黄盖）：50 ml
• 说明书：1份
• 盖板膜：1张
• 自封袋：1个

4. 设备与试剂要求

4.1 仪器

酶标仪、打印机、均质器、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量 0.01 g）

4.2 微量移液器

单道 20µl-200µl，100µl-1000µl；多道 300µl

4.3 试剂

浓盐酸、无水甲醇

5. 样本前处理

5.1 样本处理前须知

实验器具必须洁净，并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。

5.2 配液：

配液1：复溶液 用去离子水将5×复溶液稀释5倍，保存在4°C环境中可保存一个月。

配液2：工作洗涤液 将浓缩洗涤液稀释20倍。

配液3：样本提取液 取43 mL浓盐酸与去离子水混匀，定容至50 mL，再加入450 mL无水甲醇。

5.3 样本前处理步骤

详细步骤请参照产品附带的说明书，确保准确执行，以获得最佳的检测结果。

6. 酶联免疫试验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30分钟以上，确保试剂充分溶解与均匀混合。实验开始前需配制标准品应用液，确保低浓度的标准品现配现用。

7. 结果分析

通过计算样本的百分吸光率，并与标准曲线进行比较，得到样本中药物的实际浓度。建议使用尊龙凯时专业分析软件，以便于进行大量样本的快速、精准分析。

8. 注意事项

• 确保室温适宜，避免试剂变质。
• 在洗板过程中，及时进行后续操作以保证实验质量。
• 遵循安全操作规程，注意试剂的存储与使用。

9. 贮藏及保存期

试剂盒应存放于2-8℃的环境中，避免冷冻。产品有效期为1年，具体生产日期见包装盒。