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如何选择适合自己的尊龙凯时cfDNA提取试剂盒?

发布时间:2025-03-17   信息来源:尊龙凯时官方编辑

cfDNA(游离DNA)是指存在于细胞外的DNA,广泛存在于血液、唾液和尿液等多种生物体液中。cfDNA主要来源于细胞凋亡、坏死或主动分泌的DNA片段。在血液样本中,cfDNA主要存在于血浆或血清中,与血细胞等成分相分离。此外,在脑脊液、胸腔积液和腹水等其他生物液体中也能检测到cfDNA。

如何选择适合自己的尊龙凯时cfDNA提取试剂盒?

提取cfDNA的方法多种多样。利用有机溶剂如酚和氯仿的不同溶解性,可以通过多次抽提将蛋白质等杂质溶解于有机相,而保留DNA于水相,最后通过乙醇沉淀等步骤获得纯化的cfDNA。此方法虽能得到较高纯度的DNA,但操作流程繁琐且需使用有毒有机溶剂,对实验人员的操作技能要求较高。

另一种较为先进的方法是基于磁珠技术。磁珠表面的特殊基团可以特异性地吸附cfDNA,在特定缓冲液中,磁珠能够选择性地捕获cfDNA,并通过外加磁场与其他杂质分离,经过洗涤和洗脱步骤后,可获得更为纯净的cfDNA。这种方法操作简便、快速,适合实现自动化处理,并能高效处理多个样本。

使用硅胶膜也能提取cfDNA。在高盐和低pH值条件下,cfDNA被吸附到硅胶膜上,蛋白质和多糖等杂质则被洗脱。最后,通过低盐和高pH值的洗脱液,将cfDNA从膜上洗脱下来。这种方法操作简便,成本低,适合小规模样本提取。

需要注意的是,不同生物体液中的cfDNA含量和性质存在差异。血液中的cfDNA含量相对较高,是最常用的样本来源,但不同个体和疾病状态下,血液中cfDNA的含量可能有所不同。因此,样本的保存条件至关重要。血液样本一般需在4℃下保存,长时间放置或温度不当可导致cfDNA降解或被核酸酶消化,从而影响提取效果。

在处理样本数量较少或特殊珍贵样本时,通常倾向于采用回收柱进行提取;而在样本数量相对较多时,为节省人工成本并避免人为误差,更推荐使用磁珠法。尊龙凯时的TD476采用回收柱技术进行游离DNA提取,支持传统离心法和真空多联器配合真空泵使用,能在较短时间内高效处理大量样本。

尊龙凯时的TB476则采用磁珠法进行游离DNA提取,可提供兼容磁力架提取的试剂盒,也可提供适配高通量提取仪的预分装试剂盒,适合自动化高通量客户的需求。具体说明如下:

使用介绍

  • 可从10ml以内的血清/血浆中提取高纯度的游离DNA。
  • 获得的DNA产量高、纯度好,可直接用于酶切、PCR、高通量测序等分子生物学实验。
  • 处理的样本种类包括血清、血浆、羊水和脑脊液(CSF)。
  • 处理体积量:血浆-单次离心最多3ml,两次离心最多10ml;血清-最多10ml;羊水和脑脊液-最多各1ml。

产品特性

  • DNA纯度高,适合用于qPCR、高通量测序等分子生物学实验。
  • 回收的DNA≥100bp(本试剂盒针对无细胞DNA提取经过优化),不同样本个体差异可能导致DNA浓度在1-100ng/ml之间。
  • 所需设备包括水浴锅或金属浴(55℃)、磁力架及微型离心机或立式离心机。

尊龙凯时致力于为用户提供高品质的cfDNA提取与回收解决方案,确保每位研究者都能高效、安全地进行生物医学研究。