尊龙凯时通用细胞冻存试剂盒使用说明书(BA3309)

一、产品简介

本产品适用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系等的冻存保种，复苏后能够有效保持细胞的存活率，储存稳定且操作简便。

产品组分

通用细胞冻存液BA3309，100mL

保存条件

在-20℃避光保存，有效期为两年。

注意事项

• 1. 使用水平离心机并设定适当的离心参数，以避免操作不当对实验结果的影响。
• 2. 本产品为无菌产品，建议穿戴实验服及一次性手套，保证无菌操作以防止微生物污染。
• 3. 使用前确保试剂完全融化并充分混匀。
• 4. 需尽量保证冻存前细胞处于良好状态。

自备材料

细胞冻存材料

• 1. 仪器：水平离心机、细胞计数仪、-80℃冰箱。
• 2. 耗材：细胞冻存管、程序性冻存盒、低吸附枪头。

二、细胞复苏材料

细胞复苏操作所需材料：

• 1. 仪器：水平离心机、水浴锅。
• 2. 试剂：RPMI 1640培养基。
• 3. 耗材：酒精棉球、低吸附枪头、离心管。

使用方法

细胞冻存

1. 使用前将通用细胞冻存液完全融化并混匀。
2. 通过细胞计数仪计算细胞总数，冻存密度一般为1x10^6/mL。
3. 将细胞离心，弃掉上清液，保留细胞沉淀。不同细胞类型的离心条件可能有所不同，例如，人PBMC细胞的离心条件为300xg，5分钟。
4. 根据细胞数量计算加入的细胞冻存液体积，并用移液枪轻轻重悬细胞。
5. 将细胞按照体积分装至细胞冻存管中并进行标记。请务必使用专门用于液氮冻存的细胞冻存管，切勿使用普通离心管。
6. 将细胞冻存管放置于程序性冻存盒中，设置为逐步降低温度，并放入-80℃冰箱，确保温度下降速度约为1℃/min。

细胞复苏

1. 开启水浴锅，设定温度为37℃，取一离心管并加入5mL细胞培养基，温浴至培养基达到37℃，约2~5分钟。
2. 取出冻存管，立即放入水浴中快速摇晃，使冻存液迅速融化。
3. 完全融化后，用酒精棉球擦拭冻存管外部以降低污染风险。
4. 打开冻存管，逐滴将冻存液加入温浴好的培养基中，并轻轻摇晃。结束后放入水平离心机，在4℃下以300xg离心5分钟。
5. 弃去上清液，加入适当体积的培养基重悬细胞。

尊龙凯时致力于生物医疗领域，为广大客户提供高品质的冻存试剂及相关服务。我们将以卓越的产品质量和优质的客户服务赢得行业口碑。