微RNA（miRNAs）是一类高度保守的小分子非编码RNA，主要通过促进信使RNA（mRNAs）的降解或抑制其翻译来调控基因表达。至今已在人体中发现约2,500种miRNA，它们在细胞分化、增殖及凋亡等重要生物过程中均扮演着关键角色。miRNA表达的变化常与多种病理状态及恶性肿瘤相关，这使得miRNA成为有潜力的诊断生物标志物及治疗靶点。因此，miRNA检测技术越来越在临床诊断中显得尤为重要，为疾病的早期筛查、个性化治疗及改善患者预后提供了新的机会。

miRNA的生物合成是一个多步骤的过程，首先，从较长的初级转录产物pri-miRNA转换为前体miRNA（pre-miRNA），这一过程在细胞核内由Drosha酶切割实现。接着，pre-miRNA被运输至细胞质，进一步通过Dicer酶处理生成成熟的miRNA。成熟的miRNA会被引入RNA诱导沉默复合体（RISC），并指导其结合目标mRNA。一旦结合，miRNA能够降解mRNA或抑制其翻译，从而在转录后阶段有效调控基因表达。

准确且灵敏地检测miRNA是其在诊断应用中的关键。常用的检测方法包括：1. Northern Blotting，通过凝胶电泳分离RNA分子并使用标记探针杂交以检测特定miRNA；2. 定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR），将miRNA逆转录为cDNA并使用特定引物进行定量扩增；3. 微阵列分析，直接将miRNA与固定在微阵列平台上的互补探针杂交，可同时分析多种miRNA；4. 下一代测序（NGS），通过miRNA特异性接头连接和扩增后，对miRNA库进行高通量测序；5. 原位杂交（ISH），通过标记探针在组织切片中检测miRNA，从而观察miRNA的空间分布特征。

miRNAs作为生物标志物在疾病诊断、预后及治疗反应方面具有巨大的潜力。它们在血液、唾液和尿液等体液中的稳定性，使其成为非侵入性检测的理想候选者。此外，miRNAs通常在特定组织中显示异常的表达模式，适用于特定疾病或癌症的诊断。例如，循环中的miR-21和miR-155正被研究作为乳腺癌、肺癌和结直肠癌等肿瘤的生物标志物。这些miRNA可以在血液样本中被检测，从而实现早期诊断及监测治疗效果。在心血管疾病方面，miR-208和miR-499在心肌梗塞过程中表现出上调，成为早期标志物。此外，脑脊液和血液中的miRNAs也在进行研究，以用于神经退行性疾病的早期诊断和病程监测。

尽管miRNAs的检测前景广阔，但作为生物标志物的应用仍面临一些挑战。需要标准化的检测和定量程序，以降低因样本变异性和技术因素导致的假阳性和假阴性结果。尽管存在这些困难，基于miRNA的生物标志物在改善疾病诊断、预后及治疗反应方面展示了较大的潜力，然而仍需进一步研究以深入理解这些挑战并克服其限制。在这一领域，尊龙凯时希望能通过创新技术及产品，推动miRNA的应用，助力健康医疗的未来发展。